Zespół oddechowy bydła. Cz. II. Diagnostyka zespołu oddechowego bydła
Ocena oporności na środki przeciwdrobnoustrojowe
Badanie wrażliwości na środki przeciwdrobnoustrojowe można przeprowadzić zarówno metodami jakościowymi, jak i ilościową. Do metod jakościowych zaliczamy: metodę Kirby-Bauera, zwana inaczej metodą krążkowo-dyfuzyjną na podłożu Muellera-Hinton) oraz metodę PCR, która zostanie omówiona w dalszej części artykułu). Do metod ilościowych zaliczamy metodę mikrorozcieńczeń lub E-test – rzadko stosowaną metodę dyfuzyjną z wykorzystaniem paska nasączonego gradientem stężeń antybiotyku.
Metoda Kirby’ego-Bauera opiera się na dyfuzji antybiotyku zawartego w krążku bibuły do podłoża stałego (agar), na którym wysiana jest kultura bakterii. Substancja ta rozprzestrzenia się w podłożu, tworząc strefy z gradientem stężeń. Jeśli bakterie są wrażliwe na dany antybiotyk, wówczas wokół krążka widoczny jest zahamowany wzrost bakterii, a podłoże jest przezroczyste. Im większa jest strefa zahamowania wzrostu, tym wrażliwość na dany chemioterapeutyk jest większa. Gdy drobnoustrój jest oporny na antybiotyk, wokół krążka widoczne jest zmatowienie podłoża będące wynikiem wzrostu mikroorganizmu. Podczas jednego posiewu można ocenić wrażliwość badanego szczepu na kilka antybiotyków jednocześnie.
Za najbardziej wartościową spośród metod ilościowych uznaje się metodę mikrorozcieńczeń polegającą na oznaczeniu minimalnego stężenia hamującego (MIC – ang. minimal inhibitory concentration) środków przeciwdrobnoustrojowych, z użyciem płytek z zestawem antybiotyków w określonych stężeniach. Płytki mogą być sporządzane na bieżąco przez laboratorium, zgodnie z panelem badań, lub są to gotowe płytki dostępne w handlu. Zawierają one 96 dołków wypełnionych podłożem z szeregiem podwójnych rozcieńczeń antybiotyku. Zakres badanych stężeń zależy zarówno od antybiotyku, jak i cech badanego szczepu bakterii.
Minimalne stężenie hamujące wzrost bakterii (wyrażone jako stężenie antybiotyku w mg/L lub µg/ml) jest określane w pierwszym dołku szeregu rozci...
którzy są subskrybentami naszego portalu.
i ciesz się dostępem do bazy merytorycznej wiedzy!