Metabolomika – nowe narzędzie w diagnostyce chorób

Metody analityczne wykorzystywane w badaniach metabolomicznych

Dotychczas badania jakościowe i ilościowe poszczególnych metabolitów powstających w czasie prawidłowego funkcjonowania organizmu, jak i w czasie zmian patologicznych dotyczyły analizy pojedynczych metabolitów. Rozwój klasycznych metod analitycznych pozwala na oznaczenia ilościowe metabolitów w najmniejszych z możliwych stężeń, z zastrzeżeniem, że ich analiza pozwala na walidację danej metody analitycznej. Na podstawie obecności oraz poziomu danego metabolitu wyciąga się wnioski na temat funkcjonowania poszczególnych układów organizmu i określa, w jakim kierunku powinno być prowadzone postępowanie farmakologiczne najczęściej łącznie z postępowaniem dietetycznym.

Obecnie nie istnieje uniwersalna metoda analityczna, która pozwoliłaby na oznaczanie ilościowe i jakościowe wszystkich metabolitów zawartych w badanych układach biologicznych (płyn ustrojowy, tkanka). Metody rozdziału mieszanin substancji takie jak np. chromatografia wykorzystywane są podczas analizy związków obecnych w złożonych mieszaninach, a ich analiza wymaga odpowiedniej aparatury sprzężonej z odpowiednimi detektorami umożliwiającymi identyfikację odpowiedniego związku.

W chromatografii identyfikacja związku jest możliwa na podstawie porównania czasów retencji związku obecnego w próbce z czasem retencji standardu. Jednakże w wielu przypadkach z kolumny chromatograficznej eluowane są jednocześnie dwie lub więcej substancji. Poza tym podczas analizy często następuje przesunięcie w czasie elucji poszczególnych składników analizowanej próbki. Czas retencji nie jest więc najlepszym wskaźnikiem w przypadku analizowania materiału o złożonej matrycy. Zachodzi więc konieczność użycia innych detektorów lub kilku detektorów połączonych ze sobą szeregowo.

W zal...