Cytometria przepływowa – jak można wykorzystać jej zalety w diagnostyce laboratoryjnej? Cz. I

Wychodząc naprzeciw potrzebom współczesnej medycyny, prężnie rozwija się gałąź diagnostyki laboratoryjnej wykorzystująca metody szybkie i nieinwazyjne, które umożliwią wykrycie i rozpoznanie procesu chorobowego w celu podjęcia precyzyjnego działania terapeutycznego. W medycynie ludzkiej nowoczesne metody diagnostyczne są wciąż doskonalone, a ich rozwój przyczynia się także do adaptowania nowych rozwiązań do diagnostyki weterynaryjnej. Jedną z obiecujących metod stanowi obecnie cytometria przepływowa. Niniejsza praca przedstawia zasadę działania cytometrii przepływowej, istotne informacje o rodzaju i sposobie przygotowania materiału do badania, a także możliwości zastosowania tej metody, które są aktualnie wykorzystane w diagnostyce chorób zwierząt towarzyszących lub które mogą zostać wdrożone do użytku w najbliższej przyszłości.

Cytometria przepływowa to zaawansowana technika analityczna umożliwiająca pomiar wielu różnych parametrów komórek znajdujących się w płynnej zawiesinie. Indywidualny charakter komórki, w tym wielkość, ziarnistość (rozumiana jako złożoność struktury), ekspresja różnych antygenów i zawartość kwasów nukleinowych, może być określony poprzez pomiar światła rozproszonego i sygnałów fluorescencji emitowanych i rejestrowanych podczas analizy. Pozyskane dane przedstawiane są następnie w postaci wykresów – histogramów lub dwuwymiarowych wykresów kropkowych (tzw. dot-plot), na podstawie których możliwa jest interpretacja uzyskanego wyniku.

Można wyróżnić dwa główne typy cytometrów przepływowych. Analizatory, które wykorzystywane są w podstawowej diagnostyce najczęściej, umożliwiają ocenę ekspresji antygenów powierzchniowych i wewnątrzkomórkowych, ekspresji genów czy aktywności enzymów, a dane uzyskane w badaniu są następnie opracowywane statystycznie. Sortery komórkowe pozwalają dodatkowo na fizyczne rozdzielenie komórek, co umożliwia wykorzystanie ich do dalszych, skoncentrowanych na danym rodzaju komórek analiz.

Zasada działania cytome...